Diabetologia：激活但功能受损的记忆Tregs在1型糖尿病患者进展很慢的过程中逐渐扩展

从第一次消失去甲自身抗基底到消失1同型冠心病诊断副作用的令人满意赴援在儿童时期就有最好的叙述，多个去甲自身抗基底阴性的儿童之前有70%在血清转换后10年内患病冠心病，而随访15年的儿童这一百分比增大到84%。远比之下，占诊断1同型冠心病一半以上的同型1同型冠心病的发病机制还不会得到充份的深入研究。

愈发多的人开始常用分期系统来定义1同型冠心病的令人满意：个基底在消失多种去甲自身抗基底时进入第1之前，消失血糖出现异常时进入第2之前，消失副作用时进入第3之前。一些多发去甲自身抗基底阴性的个基底，在1期和2期，令人满意较快，并工业发展为发病的1同型冠心病。我们之前叙述了一小组在首次检验到多种去甲自身抗基底比对后将近10年无冠心病的以致于快令人满意者，这小组病患数量多于，但构造非常说明。随后，我们发现去甲自身特异性特异性CD8+T细胞内加成在令人满意很快的病患之前也就是说不实际上，但在近期发病和长期实际上的冠心病病患之前很更容易检验到。这确实说明了，与令人满意病患远比，这些病患自身炎症的调控减快。

更早深入研究说明了，尽管调控性T细胞内(Treg)数量也就是说，但冠心病病患实际上一些机制缺陷，其之前包括对IL-2的加成潜能下降。此外，冠心病病患之前的畸变CD4+T细胞内确实对调控不具抵抗性，展现为畸变T细胞内的诱发减快，大自然产生的Treg和基底外产生的诱导Treg，以及特异性境况的CD4+T细胞内之前IL-2加成减快。本深入研究的用以是叙述了CD4+调控性T细胞内(Treg)在这群人以致于很快令人满意者之前的构造，他们的平均年龄为43岁(31-72岁)，随访时间为18-32年。

方法：BOX深入研究是一项以青年人相结合的横向深入研究，在21岁表列患病的病患亲属之前定期检查1同型冠心病的小心环境因素。我们之前叙述了长期很快令人满意者的构造，他们保持多重去甲自身抗基底阴性超过10年，但不会消失冠心病的诊断副作用，快性或非开展性自身免疫。随后，10名继续保持无冠心病并愿意提供大量血液比对的很快令人满意者归入T和B细胞内机制深入深入研究。在现之前的深入研究之前，8名快令人满意者(SP小组)，之前位年龄43岁(31-72岁)，18 - 32岁间的去甲自身抗基底阴性。所有的大多数人都处于1同型冠心病令人满意的1期，尽管一些人随后失去了去甲自身抗基底对某些特异性的阴性加成，然而，一名病患从未处于2期将近6年，但不会消失诊断副作用，一名病患被诊断为冠心病，该测试者72岁，在采集测试比对时，其HbA1c升温到53 mmol/mol(7%)，在数据深入深入研究之前对该NADPH开展了另行评量。分开外周血单个连锁反应细胞内(PBMCs)，改用多参数流式细胞内忍术和T细胞内诱发测试评量NADPH之前Treg的频赴援、性状和机制。常用FlowSOM和CITRUS(聚类鉴定、表征和重回)开展无监理聚类深入深入研究，评量Treg性状。

结果：与肥胖症NADPH远比，来自快令人满意基底的心灵CD4+T细胞内的监理聚类推测，激活的心灵CD4+ Treg频赴援增大，与糖皮质激素诱导的TNFR相关蛋白质(GITR)理解增大有关。一名HbA1c升温的病患与令人满意很快者和给定的对照小组远比，Treg谱有所并不相同。机制深入深入研究说明了，与肥胖症NADPH远比，来自很快令人满意基底的Treg介导的CD4+畸变T细胞内诱发显着受损。展现为对畸变CD4+T细胞内CD25和CD134理解的诱发增大。

三幅1 深入的性状深入深入研究推测，CD4+Treg亚同型在快令人满意缓冲区之前增大。由FlowSOM转化成的Treg房，有数在来自所有NADPH的活CD4+CD45RA -细胞内上。根据标有物理解鉴定出10个元簇:心灵T细胞内_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;心灵T cell_4;CD49b心灵T细胞内;HLA-DR + GITR +心灵T细胞内;线程Treg_1;线程Treg_2;线程Treg_3;和线程Treg_4。(a)常用9个并不相同Treg标有转化成的10个元簇的MST。每个节点代表一个协同(100个协同)，更大的元协同(10个元协同)在节点小组周围上色。每个节点之前的饼三幅透露单个标有的理解等级。(b)每个元聚类的热三幅，以推测整基底标有理解。(c, d)为HD小组(c)和SP小组(d)转化成三幅，以及FlowSOM标有的每个元簇的裂口。(e-l)远比数量级为每个metacluster筒之前央曲线三幅(数量级> 0.05%)考虑到为HD和SP小组:线程Treg_2 (e),线程Treg_3 (f),线程Treg_4 (g), HLA-DR + GITR +心灵T细胞内(h)、心灵T cell_1(i),心灵T cell_2 (j),心灵T cell_3 (k) n d CD49b心灵T细胞内(l)。红色边框代表**SP 606。**p< 0.01, Wilcoxon分组字母秩检验。此键适用于三幅形部分(a)， (c)， (d)和d (e-l)

三幅2 常用CITRUS的预测模同型证实，Treg频赴援的增大是令人满意很快的标志。评定离子通道(a - f)和柑橘深入深入研究(g-k)比较SP大多数人和给定的HD大多数人在CD4+CD45RA−T细胞内上的差异性。(a)亲本CD25+ cd127 lotreg和CD25loCD127+T c e l群基底的别具特色三幅。CD25+ cd127lotreg被CD39和FOXP3富集，然后通过HLA-DR和GITR理解开展分开，虚拟FlowSOM群基底。(b) HD(横纹)和SP(虎纹)小组以及NADPHSP 606(红色)之前CD25+ cd127的频赴援统计三幅。(c-f) CD25+CD127loCD39+FOXP3+和CD25loCD127+离子通道子集的筒之前央曲线三幅;(c) HLA-DRloGITR−(线程Treg_2)， (d) HLA-DRintGITRlo(线程Treg_3)， (e) HLA- d RhiGITR+(线程Treg_4)， (f) HLA- d RhiGITR+(HLA-DR+GITR+线程T cell)。(g - i)玉米簇螺旋由(g) CD127， (h) CD25和(i) FOXP3理解强度着色，上标突出的簇被标有为SP和HD缓冲区间的并不相同。(j)筒之前央曲线三幅推测了在SP(虎纹)和HD(灰点)小组之前，CITRUS心灵Treg_3和Treg_4的远比数量级(百分比)。(k)三幅表推测每个簇的性状(粉红色)和Treg标有远比理解与背景理解(白色);上列，线程Treg_3;下面悄悄，线程Treg_4。背景与所有其他簇之前标有的理解有关。*p< 0.05， **p< 0.01, Wilcoxon分组字母秩检验

三幅3 与肥胖症献血者远比，令人满意很快者心灵treg的GITR增大。每个心灵CD4+T细胞内元簇(心灵T细胞内_1;心灵T cell_2;心灵T cell_3;CD49b +心灵T细胞内;HLA-DR + GITR +心灵T细胞内;线程Treg_2;线程Treg_3;来自FlowSOM的memory Treg_4)检验每个理解标有的巨大变化。(a,b)来自HD (a)和S (b)缓冲区的理解热三幅(sp606不包括在内)。(c,d)心灵Treg_4元簇之前所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(红色)的FlowSOM GITR理解串联，推测三幅表(c)和统计三幅(d)。Wilcoxon分组字母秩和检验，p< 0.07(红色)所有NADPH包括，p< 0.05(白色)NADPHSP 606和给定的HD不包括在测试之前。(e,f) HLA-DRhiGITR+Tregs之前GITR理解，从评定离子通道，从所有HD(灰色)、所有SP(白色)和SP 606(红色)串联，推测三幅表(e)和统计三幅(f) *p< 0.05, Wilcoxon分组字母秩检验

三幅4 来自很快令人满意的CD4+ treg细胞内掌控畸变CD4+T细胞内的潜能下降。SP小组用白色的之前央线和边框透露，HD小组用银色的之前央线和边框透露，红色的之前央线/边框透露NADPHsp606。常用CD4+CD25+ Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内开展分选。CD4+CD25−(需要的话者)被标有为CFSE, Treg按判读的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞内，指导3在此之后开展流式细胞内忍术检验。(a-d)与CD4+需要的话者远比应的treg指导(自基底)(e-h) HD、SP或SP 606 Treg与HD需要的话者指导。(a,b,f) CFSE细胞分裂(a,e)和CFSE诱发%-(b,f)。(c, d,h) CD25 (c,g)和CD134 (d,h)的诱发%-。常用阴性对照(激活的响应细胞内不含treg)测算诱发%-。*p< 0.05， **p< 0.01， ***p< 0.001，重复测量双向方差深入深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

三幅5 畸变CD4+T细胞内对很快令人满意的T细胞内转化的诱发更敏感。SP小组用白色的之前央线和边框透露，HD小组用银色的之前央线和边框透露，红色的之前央线/边框透露NADPHsp606。常用CD4+CD25+Treg分选试剂盒对CD4+T细胞内开展分选。CD4+CD25−(需要的话者)被cfsel标有，treg按判读的百分比滴定。用抗CD3 /28微珠转化细胞内，指导3在此之后开展流式细胞内忍术(CD25反染)和细胞内因子深入深入研究。HD Treg与HD、SP或sp606需要的话者共同完成指导。(a,b) CFSE细胞分裂(a)和CFSE诱发百分赴援(b)。(c,d) CD25诱发百分赴援(c)和CD134诱发百分赴援(d)。(e,f) IFN-γ(e)和IL-17A (f)在共指导之前的理解。***p< 0.001， **p< 0.01，重复测量双向方差深入深入研究。†p < 0.0 5 Bonferroni的事后多重比较测试

事实：我们得出的事实是，来自很快令人满意子的转化心灵CD4+Treg在GITR理解之前得到了适配和比较丰富，重申了大幅度深入研究Treg在1同型冠心病不确定性个基底之前的值得注意的必要性。

译文来历：

Boldison J, Long AE, Aitken RJ,et al.Activated but functionally impaired memory Tregs are expanded in slow progressors to type 1 diabetes.Diabetologia 2021 Oct 28